Effectene®Transfection Reagent 转染试剂中文说明书_技术资料

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1056 人阅读发布时间：2022-04-08 11:51

细胞处于最佳生理状态，原代细胞以低代数较好；
DNA（质粒）的质量直接影响转染的效率，纯化后的DNA（质粒）转染效果更好；
DNA与Effectene Transfection Reagent的用量比例可能根据具体细胞稍有变动，但DNA与Enhancer 用量比例(1:8)最好别改变。

对于24孔板，接种细胞密度为2-8X10⁴个/孔，加500ul 无抗生素培养基；
37⁰C，5%/CO2培养，转染当日细胞密度达到40%－80%；
稀释溶解在TE buffer里的0.2ug DNA（质粒），加Buffer EC直至体积为60ul,再加入1.6ul Enhancer涡旋混匀1s，低速离心甩净管壁上液滴；
室温（15–25⁰C）孵育 2–5 min ；
吸5ul Effectene Transfection Reagent到DNA-Enhancer mixture中，小心吹打5次混匀（注：Effectene Transfection Reagent 用完后要及时放回冰上，10－15min室温不会影响）；
室温静置5–10 min；
当静置的同时，吸走原有培养液，用１ml PBS漂洗一次，再加入350ul 新鲜培养基；
吸350ul培养液到转染混合液中，小心吹打两次混匀后，立即滴加到24孔板中，最后轻轻打旋混匀；
培养箱中正常培养24小时，48小时后拍照，一般情况下可以不换液，若发现对细胞有毒性的，可在6－18小时后换液。

资料格式：

QiAgen转染试剂中文说明书.pdf

细胞培养的操作步骤

各种转染试剂中文说明

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