线性PEI转染试剂——成本效益极高的阳离子聚合物转染试剂

一、线性PEI转染试剂核心原理

线性PEI（聚yi烯亚胺，Polyethylenimine）是一种带高密度正电荷的长链聚合物。其转染原理分为三步：

1.  复合物形成：带正电的PEI通过静电作用，与带负电的核酸（DNA/siRNA）结合，将其浓缩并包裹成带正电的纳米颗粒。

2.  细胞摄取：这些正电颗粒与带负电的细胞膜结合，通过内吞作用进入细胞。

3.  内体逃逸（关键步骤）：PEI具有强大的“质子海绵效应”。进入酸性内体后，PEI大量结合质子，导致内体渗透压升高、肿胀破裂，从而将核酸释放到细胞质中，避免被溶酶体降解。随后DNA进入细胞核进行表达。

二、线性PEI转染试剂主要品牌与产品

1.  Polysciences： 是线性PEI（产品号 23966，分子量25,000）的原始供应商，被视为行业标准。很多实验室购买其粉末自行配制。

2.  Polyplus-transfection： 其JetPEI和FectoPRO系列是商业化、优化后的线性PEI试剂，毒性更低，性能更稳定，使用更简便。

3.  Sigma-Aldrich： 也提供适用于转染的线性PEI。

4.  国产试剂： 如碧云天等国内品牌也提供线性PEI转染试剂，性价比高。

三、线性PEI转染试剂优点与缺点

优点：

   成本极低：自行配制时，其成本远低于商业脂质体试剂（如Lipofectamine）。

   转染效率高：对多种常见细胞系（如HEK-293, CHO, HeLa）具有很高的瞬时转染效率，尤其适合病毒包装。

   稳定性好：配制的PEI溶液可在-20°C或-80°C长期保存，不易失活。

   无动物源性成分：适用于对血清或动物成分敏感的应用。

缺点：

   细胞毒性：是其主要局限。用量过高或条件未优化时，细胞毒性明显，导致细胞死亡。

   需要严格优化：最佳转染效率高度依赖于 DNA与PEI的比例（N/P比）、细胞密度和复合物形成时间，需进行条件筛选。

   对部分细胞效果不佳：对于某些原代细胞、难转染细胞或悬浮细胞，其效率可能不理想。

   配制要求：自行配制需注意pH值调节和严格的无菌过滤，以确保有效性和无菌性。

四、 线性PEI转染试剂标准操作流程概要（以实验室自配为例）

1.  配制储备液：将线性PEI粉末溶解于无菌水或酸性水溶液中，用HCl/NaOH调节pH至7.0，过滤除菌，分装冻存。

2.  复合物形成：将质粒DNA与适量PEI储备液分别稀释于无血清培养基（如Opti-MEM）中，混合后室温孵育10-30分钟，形成DNA-PEI复合物。

3.  转染：将复合物滴加到细胞培养液中。

4.  换液：培养4-6小时后更换为完全培养基（重要，以减轻毒性）。

5.  检测：继续培养24-72小时后检测转染效率。

 总结与建议

线性PEI是追求高效率和低成本转染的jue佳选择。

   如果你需要：对HEK-293T等易转染细胞进行大规模瞬时转染以生产重组蛋白或包装病毒，且希望控制成本，线性PEI是shou选工具之一。

   你需要做好：进行细致的条件优化实验（梯度测试不同N/P比），并严格把握换液时间以控制毒性。

   替代选择：如果细胞娇贵或对毒性敏感，可考虑商业化、毒性更低的线性PEI产品（如JetPEI）或其他类型的转染试剂。

 

一句话概括：线性PEI是科研实验室里的“经济型重卡”，动力强、能拉货，但需要一位技术好的“司机”（精细优化）来驾驭，否则容易“伤车”（细胞毒性）。

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