碧云天lipo8000转染试剂介绍

一、Lipo8000核心定位与特点

Lipo8000™ 是一种 阳离子脂质体转染试剂，专为将DNA、siRNA高效导入哺乳动物细胞而设计。其核心目标是：在保证较高转染效率的同时，显著降低实验成本，尤其适合需要大规模、高频次进行转染的实验室。

主要特点：

1.  高性价比：这是其最突出的优势。价格通常仅为进口同类高端试剂（如Lipofectamine 3000）的几分之一。

2.  广谱高效：在多种常见贴壁细胞系上表现优异，特别是对于 HEK-293（包括293T）、HeLa、COS-7 等“易转染”细胞，效率可与进口高端试剂媲美。

3.  操作简便：标准流程与主流脂质体转染法一致，无需特殊设备。

4.  低细胞毒性：优化后的配方对细胞的生长干扰相对较小，在优化条件下细胞状态保持良好。

二、Lipo8000标准操作流程（以24孔板为例）

1.  细胞准备：转染当天，细胞密度达到 70%-90% 汇合度为宜。

2.  配制复合物（总体积50 μL）：

       A管：用25 μL 无血清培养基（如Opti-MEM）稀释 0.5 - 1.0 μg 质粒DNA。

       B管：用25 μL 无血清培养基稀释 1 - 3 μL Lipo8000™ 试剂（需根据预实验优化）。

       将A管液体全部加入B管，轻轻吹打或拍打混匀，室温静置 10-15分钟。

3.  转染：将50 μL DNA-Lipo8000复合物逐滴加入细胞培养孔中，轻轻摇晃混匀。

4.  换液：在 转染后4-6小时，更换为新鲜的完全培养基（此步骤对降低毒性、提高细胞存活率很重要）。

5.  检测：继续培养 24-72小时 后，检测转染效率。

三、 Lipo8000关键优化参数（成功之匙）

首次使用时，必须进行条件优化，以找到最佳平衡点：

1.  DNA用量： 通常0.25-1.5 μg/孔（24孔板）。

2.  Lipo8000™ 用量： 这是最关键的因素。推荐起始的 DNA：Lipo8000™ 质量体积比 为 1:2 到 1:4（例如，1 μg DNA 对应 2-4 μL 试剂）。需要进行梯度测试。

3.  细胞密度： 70%-90%汇合度是黄金范围。密度过低或过高都会显著影响效率和毒性。

4.  复合物孵育时间： 10-15分钟足够，过长可能降低活性。

四、 Lipo8000与主流竞品的对比

特性	碧云天 Lipo8000™	赛默飞 Lipofectamine 3000	Polyplus jetPRIME®
核心优势	ji致性价比，易转染细胞效率高	高效稳定，“金标准”体验，带 P3000™增强剂	快速便捷，复合物形成快（5分钟），广谱性好
细胞毒性	低（需优化）	低	低
价格	非常经济	昂贵	昂贵
最佳适用场景	常规细胞系（如HEK-293）的大规模、日常转染；经费有限的实验室；预实验筛选。	关键实验、难转染细胞、追求最高成功率和标准化。	快速转染，多种细胞系（包括部分难转染细胞），注重操作流程简化。

五、常见问题与解决方案

问题	可能原因	解决方案
效率低	1. DNA质量/纯度差 2. 细胞状态不佳 3. 比例未优化（最重要） 4. 复合物制备不当	1. 重新制备高纯度DNA 2. 使用低代次、生长旺盛的细胞 3. 系统优化DNA与Lipo8000的比例及细胞密度 4. 轻柔混匀，使用Opti-MEM
毒性大	1. Lipo8000用量过高 2. DNA用量过高 3. 转染后未及时换液 4. 细胞本身敏感	1. 降低Lipo8000用量 2. 减少DNA用量 3. 务必在4-6小时后换液 4. 尝试缩短复合物与细胞共孵育时间
重复性差	1. 细胞传代状态不稳定 2. 操作手法不一致（混合力度、静置时间）	1. 规范细胞培养流程 2. 严格统一操作步骤

 总结与购买建议

Lipo8000™ 是一款非常成功的“国民级”高性价比转染试剂。

   强烈推荐给：

       使用 HEK-293、HeLa 等常见易转染细胞系 进行常规过表达、报告基因、病毒包装实验的用户。

       需要高通量筛选或大量制备样品，对成本敏感的实验室。

       学生实验或方法建立阶段的预实验。

   建议谨慎或选择其他产品：

       转染非常娇贵、难转染的原代细胞、干细胞或悬浮细胞时，可先尝试优化，若效果不佳则考虑 Lipofectamine 3000 或 jetOPTIMUS® 等专为难转染细胞设计的高端试剂。

       实验对转染效率的绝对稳定性和可重复性要求极高（如关键课题的确证实验），且预算充足。

核心建议：首次使用时，请务必花费少量时间和材料，认真完成一次小规模的优化实验。一旦找到适合您细胞体系的最佳条件，Lipo8000™ 将成为您实验室经济高效的得力工具。

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