凡知医学多重一步法qRT-PCR预混液原理
114 人阅读发布时间:2024-09-03 17:01
一、凡知医学多重一步法qRT-PCR预混液目录表
二、凡知医学多重一步法qRT-PCR预混液原理
凡知多重一步法qRT-PCR预混液的原理是基于实时荧光定量PCR技术,结合一步法逆转录和扩增反应,实现对RNA模板的高灵敏度和高效扩增。
1. qRT-PCR技术的原理
实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药效分析等。
2. 预混液的主要特点
- 高灵敏度和高合成效率:通过使用特定的反转录引物和PCR引物,预混液能够在同一反应体系中一步完成从反转录到qPCR的全部反应,从而提高了实验的效率和准确性。
- dUTP/UDG系统的应用:引入了dUTP/UDG系统,这可以在反转录前降解含U的ssDNA和dsDNA,有效避免由PCR产物导致的交叉污染,提高了实验的可靠性和重复性。
- FireAmp Multiplex Probe One-Step Enzyme Mix的使用:通过使用这种酶混合物,预混液能够高效地将RNA合成第一链cDNA,并进行qPCR,确保了实验的高效性和准确性。
此外,该预混液还特别优化了扩增均一性,使得多重一步法qRT-PCR能够有效地完成,进一步提高了实验的可靠性和可重复性。通过这些技术和方法的结合,凡知多重一步法qRT-PCR预混液为科研工作者提供了一个高效、准确且可靠的实验工具,适用于各种需要高灵敏度和高效率RNA分析的研究领域。