omega质粒提取试剂盒步骤

一、Omega质粒提取试剂盒部分列表

货号	产品名称	规格
D6943	Omega质粒小提试剂盒I	100Preps，200Preps，500Preps
D6905	Omega快速法质粒中提试剂盒	5Preps，25Preps，100Preps
D6948	Omega无内毒素质粒小提试剂盒I	5Preps，50Preps，200Preps

 

二、‌Omega质粒提取试剂盒的步骤一

【‌细菌培养】‌：首先，在200-400mL的培养瓶中加入30-50mL的LB培养基（含有抗生素，如AMP或KAN），然后接种含所需质粒的菌种于37℃摇床培养12-16小时。推荐使用E.coli (endA-)菌株，如DH5a和JM109，以获得最佳结果。细菌达到最佳生长条件对获得最高质粒DNA产量至关重要。

三、‌Omega质粒提取试剂盒的步骤二

【‌细菌收集与处理】‌：过夜培养后，通过离心收集细菌，并弃去上清液。使用纸巾除去多余的介质。

四、‌Omega质粒提取试剂盒的步骤三

【‌细胞重悬、裂解与中和】‌：在细胞重悬液中重悬细菌，加入细胞裂解液并轻轻混合翻转管3-5次或混合裂解液轻轻滚动。室温下孵育3分钟。如果细胞裂解液过冷，可能会发生SDS沉淀，导致细胞裂解不良。如果有沉淀形成，将细胞裂解液加热到37°C，并轻轻摇晃。然后加入中和液，盖住并轻轻翻转5-10次。

五、‌Omega质粒提取试剂盒的步骤四

【‌离心与纯化】‌：在室温下离心15000g 15分钟，以去除细菌碎片。使用PureYield™清除柱清除剩余碎片。将澄清的裂解液倒入PureYield™结合柱中，启动真空泵，使裂解液通过PureYield™清除柱和结合柱。

六、‌Omega质粒提取试剂盒的步骤五

【‌洗脱与收集】‌：在进行前，从过滤装置中缓慢释放真空。移除PureYield™清除柱，将PureYield™结合色谱柱留在泵上。向柱中加入内毒素清除液，让真空泵将溶液穿过结合膜，以进一步纯化质粒DNA。

七、‌Omega质粒提取试剂盒的步骤六

【‌质粒DNA的收集】‌：最后，通过适当的洗脱缓冲液洗脱质粒DNA，收集洗脱液，并根据需要进一步处理或储存。

 

注意：整个过程需要在适当的温度下进行，并且需要注意操作的速度和准确性，以确保质粒DNA的质量和纯度‌。