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技术资料/正文

Polysciences转染试剂的作用原理和方法

117 人阅读发布时间:2024-12-13 10:00

一、Polysciences转染试剂的作用原理

‌主要包括细胞膜穿透机制和核酸释放机制。细胞膜穿透机制包括离子共价结合、脂质体介导和蛋白质介导等。离子共价结合是通过转染试剂与DNA或RNA形成带电复合物,利用复合物与细胞膜上的负电荷之间的吸引作用穿过细胞膜。脂质体介导是通过脂质体与细胞膜融合,将内部的核酸释放到细胞质中。蛋白质介导则是利用转染试剂与核酸形成蛋白质/核酸复合物,通过细胞膜上的蛋白质受体介导转运‌。

二、转染试剂的具体方法

‌包括以下几种:

  1. 磷酸钙法‌:通过磷酸钙与DNA形成复合物,利用复合物的电吸引作用穿过细胞膜进入细胞质‌。
  2. 显微注射法‌:通过显微操作将DNA直接注入单个细胞中‌。
  3. 电穿孔法‌:利用短暂的高压电场使细胞膜形成微孔,使外源物质进入细胞‌。
  4. 脂质体介导法‌:脂质体与DNA形成复合物,通过脂质体与细胞膜融合将DNA释放到细胞内‌。
  5. 病毒载体法‌:利用病毒作为载体,通过病毒感染的方式将外源DNA导入细胞,其中逆转录病毒及腺病毒转染系统最为常用‌。

三、Polysciences转染试剂使用方法

1.选择适当的细胞株:首先需要准备适当的细胞株,通常需要选择适合于转染的细胞类型。通常建议使用易于培养的细胞株,如HEK293T、CHO等。

2. 准备DNA或RNA:接下来需要准备要转染的DNA或RNA。通常需要将DNA或RNA溶解在适当的缓冲液中,并确保其浓度和纯度符合要求。

3.配置Polysciences转染试剂:根据实验需求,选择适当的Polysciences转染试剂,并按照说明书配置适当的浓度和比例。

4.混合DNA或RNA和转染试剂:将准备好的DNA或RNA与Polysciences转染试剂混合在一起,确保均匀混合。

5.将混合好的DNA或RNA-Polysciences溶液加入到细胞培养基中:静置一段时间后,将细胞重新接种到培养瓶中。

6.培养和观察:将细胞放入适当的培养条件下进行培养,通常需要观察一段时间,以确定转染是否成功。

7.分析和记录:对转染后的细胞进行适当的分析和记录,如检测基因表达、蛋白表达、细胞活性等指标。

Polysciences代理——北京百奥创新为您提供Polysciences转染试剂,如需,请联系!

品牌 货号 商品名称
Polysciences 23966-100 Polyethylenimine, Linear, MW 25000, Transfection Grade (PEI 25K)
Polysciences 24765-100 PEI MAX - Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000)

Polysciences转染试剂的作用原理和方法

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