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技术资料/正文
细菌总 RNA 提取方法的比较
258 人阅读发布时间：2022-04-02 15:01
实验原理：RNA 的提取是分子生物学的基础实验，对于cDNA 文库构建、荧光定量PCR、RT-PCR、Northern 杂交等下游分子生物学实验来说，都需要质量好的，完整性高的 RNA。常见的细菌 RNA 提取方法有强变性剂法、CTAB法、SDS-Phenol 法以及热硼酸法等。国内外生物试剂公司研发出了许多细菌RNA 提取试剂盒。比如ZYMO Research的Quick-RNA Microprep Kit、Takara 公司的RNAiso Plus； Invitrogen 公司的 Trizol 总RNA 提取试剂盒以及PureLink™ RNA Mini Kit等。都可以从细菌或者培养细胞中快速有效地提取出高质量高纯度的RNA。目前，国内很少有报道细菌RNA 提取的。以谷草芽孢杆菌 、大肠杆菌 、 乳酸乳球菌3株菌作为实验材料，对比RNA 的提取方法。
实验试剂：10×30 mMTris-HCL、100×1 mM EDTA、10×10 mM Tris-HCL，pH 7.5、3 M NaOAc (pH 5.2)、50×TAE 缓冲液
实验试剂盒：Trizol 法，Trizol 总RNA 提取试剂盒，Invitrogen 公司；RNAiso Plus 法，RNAiso Plus 试剂盒，Takara 公司；Qiagen 法，RNeasy Protect Bacteria Mini Kit， Qiagen 公司；逆转录试剂盒，First Strand cDNA Synthesis Kit，赛飞生物公司。
实验试剂：10×30 mMTris-HCL、100×1 mM EDTA、10×10 mM Tris-HCL，pH 7.5、3 M NaOAc (pH 5.2)、50×TAE 缓冲液
实验试剂盒：Trizol 法，Trizol 总RNA 提取试剂盒，Invitrogen 公司；RNAiso Plus 法，RNAiso Plus 试剂盒，Takara 公司；Qiagen 法，RNeasy Protect Bacteria Mini Kit， Qiagen 公司；逆转录试剂盒，First Strand cDNA Synthesis Kit，赛飞生物公司。